Cercetarea a stabilit valoarea acestor oligonucleotide antisense bifuncționale sau bipartite (ASO-uri) – analogi scurți, sintetici, de acid nucleic cu o porțiune antisense și o coadă reglatoare care recrutează supresoare de splicing – în terapiile țintite ARN.
DMD este o afecțiune musculară progresivă recesivă legată de cromozomul X care afectează de obicei numai băieții și cauzează slăbiciune și degenerare musculară din cauza mutațiilor într-un gen care codifică proteina distrofină.
Folosind tehnica lor avansată ASO, cercetătorii au reușit să treacă peste exoni mutați în gena DMD și să restaureze expresia distrofinei în mușchii modelelor de șoareci ale bolii.
Profilul de siguranță a fost considerat favorabil în modelele de șoareci și maimuțe cynomolgus.
„Aceste rezultate indică faptul că tehnologia ASO bipartită este o platformă eficientă pentru terapiile de skipping al exonilor”, au raportat cercetătorii.
ASO-urile de skipping al exonilor au fost deja aprobate pentru tratamentul DMD, dar design-urile convenționale adesea lipsesc puterea necesară pentru rezultate terapeutice robuste.
Cercetătorul principal Pengchao Feng, de la Nanjing Antisense Biopharm, și echipa sa au dezvoltat, prin urmare, o tehnologie ASO bipartită folosind o secvență scurtă 5’-splice site decoy (5D) care a promovat skipping-ul eficient al exonilor.
Tehnica simplă dar eficientă 5D-ASO folosește o secvență de coadă scurtă pentru a îmbunătăți reprimarea de splicing exercitată de o parte antisense.
Coadă este purtată de partea antisense la un exon de interes printr-un ARN mesager precursoare țintă. Aici, interferă cu recunoașterea site-ului de 5’-splice al exonului și îmbunătățește semnificativ skipping-ul exonului în comparație cu ASO-urile fără astfel de cozi.
Abordarea 5D-ASO a reușit să treacă eficient peste exoni mutați în gena DMD și să restaureze expresia distrofinei în țesuturile musculare ale unui model de șoareci cu distrofie musculară.
În special, o coadă de 8 nucleotide atașată la capătul 5’ al secvențelor antisense care vizează exonul 51 al DMD a îmbunătățit robust skipping-ul acestuia în mușchii scheletici și cardiaci, cu o restaurare eficientă a distrofinei la șoarecii modificați genetic după administrare sistemică.
„Am confirmat aplicabilitatea largă a 5D-ASO cu gene și exoni diversi”, au raportat cercetătorii.
„Mai mult, folosind exonul 51 al DMD ca exemplu, am demonstrat că această metodă este eficientă robust în vivo.”
Ei au adăugat: „ASO-ul principal a arătat un skipping marcat al exonului și un profil de siguranță favorabil în maimuțele cynomolgus, evidențiind abordarea ca un instrument puternic în terapiile antisense.”
Sursa articol https://insideprecisionmedicine.com
Senior Editor RevistaSanatatii.ro. Pasionat de lifespan, fan David Sinclair.
