CGD este o imunodeficiență moștenită rară marcată de activitatea defectuoasă a oxidazei NADPH, rezultând în infecții recurente bacteriene și fungice și inflamații cronice. Aproximativ un sfert din toate cazurile de CGD din America de Nord și Europa duc la p47-CGD, din care aproximativ 80% pot fi atribuite variantelor din NCF1, care codifică subunitatea p47phox a complexului oxidazei NADPH. Cei mai mulți indivizi afectați poartă aceeași ștergere a două baze, prezentă și în două pseudogene vecine cu o omologie de secvențiere de peste 99%. Acest lucru implică faptul că cei mai mulți indivizi cu p47-CGD au șase alele delGT potențial corectabile.
PM359 folosește editarea prime pentru a converti secvența delGT în GTGT în NCF1 și, când este prezentă, în pseudogenele sale. Propriile HSC CD34+ ale pacienților sunt electroporate pentru a livra mașinăria moleculară pentru editarea prime ex vivo înainte de a fi reinfuzate după condiționarea cu busulfan. Pentru a testa siguranța și eficacitatea PM359, cercetătorii de la Prime Medicine au efectuat mai întâi studii preclinice folosind editarea prime a celulelor CD34+ de la patru indivizi cu p47-CGD. PM359 a produs rate puternice de corecție, cu 82% dintre celulele formatoare de colonii purtând cel puțin o alelă reparată și mai puțin de două procente arătând editări nedorite.
Când au fost transplantate în șoareci imunodeficienți, celulele corectate au persistat cel puțin 16 săptămâni și au produs celule mieloide funcționale capabile să genereze specii reactive de oxigen – activitatea antimicrobiană lipsită în CGD. Spre deosebire de editarea cu nucleează Cas9, editarea prime nu a cauzat pierderi detectabile de genom, anomalii cromozomiale sau mutații în afara țintei. Celulele editate au arătat o încorporare normală și au redus semnificativ semnalizarea interferonului crescută caracteristică CGD.
Doi bărbați, în vârstă de 18 și 57 de ani, au primit PM359 după o condiționare mieloablativă. Ambii sufereau de CGD de mult timp, cu complicații precum infecții pulmonare, abcese hepatice și colită asociată CGD. Produsele lor PM359 purtau niveluri semnificative de alele corectate (68% și 91% dintre celulele formatoare de colonii).
Încorporarea a fost rapidă: neutrofilele la zilele 14-16 și trombocitele la zilele 12-19, fără evenimente adverse grave legate de PM359. Într-o lună, ambii pacienți au atins o activitate neutrofilă NADPH oxidativă aproape normală, cu ≥69% neutrofile dihidrorodamină-pozitive la intensitatea donatorului sănătos. Nivelele restabilite ale activității oxidazei NADPH au rămas stabile cel puțin șase luni. Testarea măduvei osoase a confirmat dura
Sursa: [Link către articolul original](linkul_sursei_originalului)
Senior Editor RevistaSanatatii.ro. Pasionat de lifespan, fan David Sinclair.
