Este bine cunoscut faptul că cheagurile de sânge, care se formează atunci când trombocitele se leagă între ele, reprezintă o problemă serioasă pentru persoanele în vârstă. Cheagurile arteriale provoacă direct atât atacuri de cord, cât și accidente vasculare cerebrale, fiind adesea punctele culminante ale îmbătrânirii cardiovasculare treptate, dar modificările în comportamentul HSC conduc și la multe alte condiții.
În calea canonică, HSC trec prin trei tipuri intermediare de celule înainte de a deveni, în cele din urmă, progenitorii de megacariocite (MkPs), care formează megacariocitele care eliberează trombocite. Echipa aceasta a descoperit anterior că există și o cale non-canonica care crește odată cu vârsta, transformând HSC direct în MkPs, fără niciun pas intermediar. Mai rău, această lucrare anterioară a constatat că trombocitele create de către MkPs non-canonice (ncMkPs) sunt hiperaactive, crescându-și potențialul de contribuție la bolile legate de coagulare.
Pentru a ilustra aceste diferențe, cercetătorii au creat un model de șoarece, FlkSwitch, care exprimă proteina fluorescentă verde (GFP) în MkPs care trec prin calea canonică și o altă proteină fluorescentă, Tomato, în MkPs care urmează calea mai rapidă, non-canonica. Acest articol este o examinare mai atentă a diferențelor dintre aceste MkPs, deoarece cercetătorii au dorit să le identifice fără a avea nevoie de șoareci specializați și să determine diferențele funcționale dintre ele.
În primul lor experiment, cercetătorii au combinat rezultatele lor anterioare de secvențiere ARN în vrac cu secvențierea la nivel de celulă unică. Căutau proteine legate de membrană, care ar putea fi folosite în studii viitoare sau chiar în practica clinică pentru a determina care MkPs sunt care, și au căutat proteine pentru care există deja anticorpi disponibili comercial.
Inițial, cercetătorii s-au concentrat pe CD54 ca proteină țintă, dar munca ulterioară a arătat că CD48 se potrivește mai bine; MkPs care exprimă mai mult CD48 sunt mult mai susceptibile să fie create printr-o cale canonică, așa cum s-a determinat prin comparațiile GFP și Tomato. O altă proteină, CD321, s-a dovedit a fi un predictor puternic în cealaltă direcție; MkPs care exprimă cantități mari ale acestei proteine sunt mult mai susceptibile să fie create printr-o cale non-canonica. Această combinație de CD48 și CD321 a fost foarte utilă în crearea unei baze solide pentru diferențierea MkPs, deoarece a produs rezultate similare cu cele obținute din șoarecii FlkSwitch.
Un alt experiment a constatat că ncMkPs nu sunt exclusiv pentru animalele în vârstă. La șoarecii masculi cu vârste între 2 și 3 luni, aproximativ unul din cinci MkPs este creat prin calea non-canonica. În cazul șoarecilor bătrâni de sex masculin, totuși, acest lucru se schimbă la o medie de trei din cinci, deși există variații mari între animale. Pentru șoarecii de sex feminin, a existat o creștere semnificativă cu vârsta, dar era mai puțin vizibilă.
